一种新的免疫测定法检测到骨关节炎关节软骨

北京医院治皮肤病 https://m-mip.39.net/nk/mipso_6983143.html

研究背景

II型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖(大量聚集蛋白多糖)是软骨细胞外基质的两个主要成分;

胶原蛋白分子的基质降解和丢失可能会显着导致关节炎患者的关节软骨破坏和功能丧失;

目前,缺乏足够的方法来检测特定胶原分子的损伤及其释放,因此很少有关于II型胶原降解的研究。

科学(技术)问题

缺乏精确特异性检测二型胶原蛋白损伤的方法

系统设计

构建人II型胶原蛋白aI(11)-CB1IB+卵清蛋白;

注入动物体内诱导期产生抗体monoclonalantibodyCOL2-3/4m及其性质的坚定和CollagenII亲和力和特异性的检测;

检测人体OA软骨中胶原的降解情况和胶原总量的变化。

图1:牛胶原蛋白的SDS-PAGE和Westernimmunoblot分析

结果发现

抗体COL2-3/4m与变性II型胶原反应,但与变性I型、-III型或X型胶原不反应

通过使用该方法对人OA软骨破坏情况进行检测,证明OA软骨中II型胶原原位损伤增加,总II型胶原含量减少

图2:不同患者股骨软骨的全部II型胶原和变性II型胶原含量

创新点

文中最大的创新点是通过合成人的位于II型胶原CB11肽段的ɑ1(II)-CB11B,并用其制备了单克隆抗体(COL2-3/4m),证实COL2-3/4m能特异性靶向ColII

作者将COL2-3/4m与ELLSA技术相结合开发了一套能精确检测降解ColII的检测方法,同时通过该方法首次对人OA软骨进行检测,证明OA软骨中ColII原位损伤增加,总ColII含量减少

潜在应用与影响力

该研究为对软骨降解ColII的精确检测提供了重要实验依据,为软骨疾病相关实验研究和临床诊断提供一种可能的检测方法。

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